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產(chǎn)品詳情
操作說明
注意事項
產(chǎn)品簡介
PI，即碘化丙啶，是一種溴化乙啶的類似物，能夠與DNA強力結(jié)合，它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光，實現(xiàn)對DNA或細(xì)胞核的染色。PI不能穿透完整細(xì)胞膜，但能穿透凋亡晚期細(xì)胞及死細(xì)胞的破損細(xì)胞膜，利用該特點，PI通常與Calcein-AM或FDA等熒光探針聯(lián)合使用，進(jìn)行活死細(xì)胞染及觀察色，或采用流式細(xì)胞儀相對定量檢測細(xì)胞凋亡（apoptosis）及細(xì)胞周期。PI-雙鏈DNA復(fù)合物的最大激發(fā)波長為535nm，最大發(fā)射波長為615nm。
本產(chǎn)品PI染色液為即用型，PI濃度為100 μg/mL，可直接用于壞死細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，以及細(xì)胞懸液用此染液染色后可以用于流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期。
儲存與運輸
冰袋（wet ice）運輸；4℃避光保存，有效期6個月。
使用方法
l 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期操作步驟：
1. 培養(yǎng)好的活細(xì)胞經(jīng)消化、PBS洗滌、低速離心收集得到細(xì)胞沉淀。
2. 向細(xì)胞沉淀中緩慢加入1-3 mL -20℃預(yù)冷的90%乙醇，重懸細(xì)胞，冰浴過夜。
3. 1500轉(zhuǎn)離心5min收集細(xì)胞，以PBS重懸，再次離心，去除上清液。
4. 加入250 μL PBS重懸細(xì)胞。
5. 加入2 μL濃度為1 mg/mL的RNase A，37℃水浴40 min。
6. 加入50 μL PI染液，避光孵育20 min（時間可根據(jù)實驗材料的染色結(jié)果調(diào)整）。
7. 流式細(xì)胞儀檢測。
l 熒光顯微鏡觀察活死細(xì)胞操作步驟：
1. 培養(yǎng)好的貼壁細(xì)胞，去除培養(yǎng)基，用PBS清洗2次。
2. 將PI染液用PBS稀釋10-20倍，配制成至終濃度為5-10 μg/mL的PI染色工作液。向孔板內(nèi)加入適量PI染色工作液覆蓋細(xì)胞，室溫避光孵育5-10 min。
3. 棄去染色工作，加入PBS覆蓋細(xì)胞，熒光顯微鏡觀察。死細(xì)胞或凋亡晚期細(xì)胞的核呈紅色熒光。
注意事項
1. 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。
2. 操作時請穿實驗服，并佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途，不用于臨床診斷！
凡合肥萬物生物科技有限公司銷售的產(chǎn)品均有嚴(yán)格的質(zhì)量保證。如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品存在包裝規(guī)格疑問，請于收貨之日起七日內(nèi)向我公司總部或當(dāng)?shù)剞k事處提出，并請保證該產(chǎn)品，以備本公司進(jìn)行核對檢驗。如果發(fā)現(xiàn)有質(zhì)量問題，請于收貨后一月內(nèi)保留產(chǎn)品50%以上的量，以便本公司回收產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)檢，確認(rèn)產(chǎn)品質(zhì)量。如逾期，則視為已經(jīng)對本公司產(chǎn)品進(jìn)行驗收。 聲明：如發(fā)生產(chǎn)品索賠事宜，本公司僅在產(chǎn)品價格范圍內(nèi)酌情賠償，恕不接受超出產(chǎn)品價格范圍之賠償?？蛻粼谑褂眠^程中有任何技術(shù)問題可以撥打技術(shù)售后服務(wù)電話我們隨時給予解答。
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